全自動蛋白純化儀器——全自動蛋白質(zhì)提取純化的方法有哪些？

全自動蛋白純化儀器的分離純化在生物化學(xué)研究應(yīng)用中使用廣泛。全自動蛋白純化儀器要利用不同蛋白間內(nèi)在的相似性與差異，利用各種蛋白間的相似性來除去非蛋白物質(zhì)的污染，而利用各蛋白質(zhì)的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來。

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根據(jù)蛋白質(zhì)溶解度不同，全自動蛋白純化儀器的分離純化可分為鹽析法和等電點(diǎn)沉淀法。鹽析一般是指溶液中加入無機(jī)鹽類而使溶解的物質(zhì)析出的過程。如：向某些蛋白質(zhì)溶液中加入某些無機(jī)鹽溶液后，可以下降蛋白質(zhì)的溶解度，使蛋白質(zhì)凝聚而從溶液中析出。這是一種物理變化，可復(fù)原。

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等電點(diǎn)沉淀法是利用蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時溶解度極低，而各種蛋白質(zhì)又具有不同等電點(diǎn)的特色進(jìn)行分離提取的方法。全自動蛋白純化儀器在等電點(diǎn)時，蛋白質(zhì)分子以離子形式存在，其分子凈電荷為零，此時蛋白質(zhì)分子顆粒在溶液中因沒有相同電荷的相互排斥，分子相互之間的作用力減弱，其顆粒極易碰撞、凝聚而產(chǎn)生沉淀，所以蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時，其溶解度極小，最易形成沉淀物。

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要注意的是，不同的蛋白質(zhì)，具有不同的等電點(diǎn)。在全自動蛋白純化儀器生產(chǎn)過程當(dāng)中應(yīng)根據(jù)分離要求，除去目的產(chǎn)物之外的雜蛋白；若目的產(chǎn)物也是蛋白質(zhì)，且等電點(diǎn)較高時，可先除去低于等電點(diǎn)的雜蛋白。同一種蛋白質(zhì)在不同條件下，等電點(diǎn)不同。